cy3 cy5是什么意思
cy3受激发后是肉眼可见的红光，发射波长在600nm（严格来说是橙色，但你不要指望人可以分辨出这种橙色和shu后面的cy5的红色）。cy5受激发后肉眼可见仍然是红光，发射波长在700nm。这是因为肉眼对波谱的分辨率是比较粗的，虽然cy3和cy5受激发后的发射波长差几十nm，但都在600以上，而人肉眼可见的波谱范围在400-700nm；从波长由高到低排列是常说的红橙黄绿蓝紫，这个红，和橙很多时候其实很很难区分开的，所以，一般在拍荧光的时候，我们都给它着上别的颜色，使得我们肉眼就可以很清晰的分辨这些不同的荧光。扩展资料：在基因芯片的实验中，首先选取来自不同状态的样本，如正常组织与肿瘤组织、不同发育阶段组织，或用药前后的细胞或组织等。其中一种被称为实验样本，另一种就是相应地被称为参考样本。实验样本和参考样本mRNA在逆转录过程中，分别用不同的红、绿荧光基团标记，并将它们混合，与微阵列上的探针序列进行杂交，经过适当的洗脱步骤后，用激光扫描仪对芯片进行扫描，获得对应于每种荧光的荧光强度图像，通过专用的图像分析软件，可获得微阵列上每个点的红、绿荧光强度（Cy5和Cy3），其比值（Cy5/Cy3）称为该基因在实验样本中的表达水平。参考资料来源：百度百科-基因表达谱
巯基怎么修饰到适配体上的
线性DNA在纳米金表面上的构象为连接巯基的一端缠绕在纳米金表面，另一端与表面垂直向外伸展，随着表面探针容量的增加，每条DNA探针缠绕在纳米金表面上的长度不断减小，而同时向外延伸的尾部越来越长，这样就把巯基修饰到适配体上了。纳米金表面保持被DNA碱基吸附包裹的低表面自由能状态上述构象可以描述为DILOT模型，对于核酸传感器探针设计和基于DNA杂交的纳米组装等应用具有重要的指导意义。是利用动态光散射测定组装过程中线性DNA或核酸适配体与纳米金复合物的水合粒径，结合吸附动力学，分别测定线性DNA或核酸适配体在不同表面包被量时在纳米金表面上的构象。巯基的检测方法：1. RP-HPLC法测定巯基含量。采用色谱柱Kromasil-C18 (250×4.6mm, 5μm)，流动相A(0.1%TFA)和流动相B（甲醇）梯度洗脱：流动相B 40%~80%，0~10min，然后80% B保持5min，流速0.8mL/min，检测波长327nm，得到NTB标准曲线y=3.67059x+0.14123，回收率101.9%，RSD=l.17%，从而建立了一种高灵敏度巯基检测方法。2. 采用分子荧光光谱法作为反应条件，用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定巯基。用OPA、丹酰氯、茚三酮与半胱氨酸反应，测其可见紫外吸收光谱及荧光光谱；在不同PH、温度、反应时间条件下，用OPA与半胱氨酸反应测其荧光度；分别吸收0.1mmol/L半胱氨酸溶液0、20、40、60、80、100μl，各加入10μlHO,室温下反应30min，然后加热蒸干，残渣用200μl OPA衍生液，定容至5 ml，4 min时测其荧光光谱。取pH8.4的硼酸缓冲溶液5μl，混合10次；加入OPA衍生液2μl，混合进样走HPLC。梯度条件：洗脱液B所占比例0min为0，17min线性增加至60%，17.5min线性增加至100%，20min洗脱结束。激发波长为340nm,荧光检测波长为450nm。3.柱前衍生高效液相色谱-紫外检测法。以tris(2-carboxylethyl)–phosphine (TCEP)为还原剂，7–fluorbenzo–2–oxa–1,3–diazole–4-sulfonate(SBD-F)为衍生剂，N-乙酰半胱氨酸为内标，C8色谱柱分离，流动相为甲醇－磷酸盐缓冲液（pH =3. 0），梯度洗脱，385 nm处检测。线性范围为8. 3～1042. 6μmol/L,最低检测限为0.42μmol/L,日内精密度为1.67%～1.86%,日间精密度为2.08%～3.06 %,平均回收率为98.1%～103.2 %。4. 电化学脱附与荧光技术联用。将样品固定在烷基硫醇自组装膜修饰的金电极表面，通过荧光试剂马来酰亚胺与游离巯基反应原位标记GSH,恒电位条件下脱附电极表面吸附物，检测脱附物在0.1 mol·L.KOH溶液中的荧光强度。5.拉曼光谱法。对于巯基在拉曼光谱方面研究主要集中在含巯基的芳香族化合物上，根据李晓伟等研究，巯基与银反应生成牢固的－SAg键，失去了原有的特征性巯基氢键，其光谱特点发生明显改变。以上内容参考：百度百科-巯基
