t载体

什么是克隆载体，什么是表达载体？

一、原理不同1、克隆载体：采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体，在载体上插入合适大小的 外源DNA片段，并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中，并在宿主细胞中大量繁殖。2、表达载体：在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等)，使目的基因能够表达的载体。二、要求不同1、克隆载体：能在宿主细胞中复制繁殖，而且最好要有较高的自主复制能力；容易进入宿主细胞，而且进入效率越高越好；容易从宿主细胞中分离纯化出来， 这才便于重组操作。2、表达载体：常用细菌质粒进行构建，构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端（多为黏性末端，也有平末端），采用DNA连接酶连接，导入生物体实现表达。三、组成部分不同1、克隆载体：病毒、质粒或高等生物细胞。2、表达载体：目的基因、启动子、终止子、标记基因。参考资料来源：百度百科-表达载体 百度百科-克隆载体

为什么T载体是专门用来克隆PCR的载体

亲~[微笑]很高兴为您解答：T载体是专门用来克隆PCR的载体是因为：DNA水解酶相当于剪刀，剪断DNA，而T载体容（DNA连接酶）就相当于针线。如果克隆时不用，就不能将DNA连接起来。T载体是聚合酶链反应产物的克隆运载体，线性化后两侧3′端各多出一个脱氧胸苷酸(T)。由于PCR产物两侧3′端通常含单个脱氧腺苷酸(A)，与T载体之间的A-T互补性可提高PCR产物克隆的效率。【摘要】
为什么T载体是专门用来克隆PCR的载体【提问】
亲~[微笑]很高兴为您解答：T载体是专门用来克隆PCR的载体是因为：DNA水解酶相当于剪刀，剪断DNA，而T载体容（DNA连接酶）就相当于针线。如果克隆时不用，就不能将DNA连接起来。T载体是聚合酶链反应产物的克隆运载体，线性化后两侧3′端各多出一个脱氧胸苷酸(T)。由于PCR产物两侧3′端通常含单个脱氧腺苷酸(A)，与T载体之间的A-T互补性可提高PCR产物克隆的效率。【回答】

什么是T载体？T载体分为哪几类？有什么区别?

T载体又称T-vector。聚合酶链反应产物的克隆运载体，线性化后两侧3′端各多出一个脱氧胸苷酸(T)。由于PCR产物两侧3′端通常含单个脱氧腺苷酸(A)，与T载体之间的A-T互补性可提高PCR产物克隆的效率。

T载体是一种克隆载体，也就是用于在受体细胞中进行目的基因扩增的载体，它不能大量表达。多用于克隆PCR产物，一般用一些常见的载体改造成的，一般的DNA聚合酶没有3'-5'核酸外切酶活性，即酶的校正活性，在PCR产物3'末端以非模板依靠方式加上一个腺苷酸残基（A），这样PCR产物的3'腺苷酸可和T-载体的3'胸腺嘧啶 互补，T-载体系统进行有效连接的基础正是这种碱基配对作用。相反，有校正活性的聚合酶将移去这个3' 突出端，产生平端PCR产物，这种产物不能直接用T-载体系统进行克隆。
假如想要一PCR扩增基因的产物大量表达，常见的方法是先将PCR产物连入T载体扩增（所用T载体需事先设计好酶切位点），再用相应酶切下目的片段，然后连入以同样酶切处理后的表达载体大量表达蛋白质。