什么是基因探针,用途是什么?
基因探针是一种基因型的快速判断方法,分子探针既然已经有了想要检测的基因片段,甚至是精确到基因片段中的某个易发生突变的位点,那么如何才能快速地判断该片段或者该点的基因型呢。那就是分子探针技术。分子探针通常是由几十个特定类型的脱氧核糖核苷酸所构成,简单地说也就是人工合成的小段DNA序列。该技术所依赖的一个重要原则就是脱氧核糖核苷酸碱基之间所存在的互补配对作用。每种探针都会通过碱基互补配对作用,和与之对应的一种基因相互配对杂交。碱基互补配对原则是指在DNA分子结构中,也就是常提到DNA的“双螺旋”结构中,能相互配对结合的两个碱基必须具有相同的氢键数目,并且DNA两条链之间的距离必须保持不变。这就使得碱基配对必须遵循一定的规律,A腺嘌呤一定与T胸腺嘧啶配对,G鸟嘌呤一定与C胞嘧啶配对。其中,氢键是一种电荷相互作用,像一双无形的手,把两个分子牢牢“拉”在一起。如果分子探针能与待测的DNA片段成功配对杂交,就会释放处在探针顶端的荧光信号,说明待测的DNA样品中含有这种基因。而没有成功配对杂交的,则不会产生荧光。人们通过计算机对荧光信号进行分析,就可获得样品的遗传信息。A与T、G与C正确互补配对后可在芯片上释放荧光信号探针设计的难点但是即使遵循DNA互补配对原则,仍然有可能发生碱基错配的情况,使得探针错误地与其他原本不匹配的基因发生杂交,这是探针设计的难题之一。
基因探针的原理和本质是什么?
基因探针的原理和本质是运用一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列,通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩瀚的基因组中把目的基因显示出来。作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:1、应是单链,若为双链,必须先行变性处理。2、应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基因,也可以仅仅是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。扩展资料:进行分子突变需要大量的探针拷贝,后者一般是通过分子克隆(molecular cloning)获得的。克隆是指用无性繁殖方法获得同一个体、细胞或分子的大量复制品。当制备基因组DNA探针前,应先制备基因组文库,即把基因组DNA打断,或用限制性酶作不完全水解,得到许多大小不等的随机片段,将这些片段体外重组到运载体(噬菌体、质粒等)中去,再将后者转染适当的宿主细胞如大肠杆菌。这时在固体培养基上可以得到许多携带有不同DNA片段的克隆噬菌斑,通过原位杂交,从中可筛出含有目的基因片段的克隆,然后通过细胞扩增,制备出大量的探针。参考资料来源:百度百科——基因探针

