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时间:2025-12-03 22:00:26编辑:莆田seo君

有用过QIAGEN提取植物DNA的试剂盒的吗

植物DNA提取方法

方法一:
1.取两片幼嫩新鲜叶片,置于预冷的研钵中,倒入适量液氮,迅速研磨成粉末状,随后加入3ml预热的2%CTAB抽提缓冲液和50ul抗氧化剂2-巯基乙醇,继续研磨成略有流动性的糊状或粥状,转入1.5ml的离心管中,于65℃水浴锅中保温约60min。
2.待混合物冷却至室温后加入等600ul的CI(氯仿:异戊醇=24:1)溶液混匀,轻轻颠倒离心管几次使管内混合物成乳浊液,常温下10000rpm离心10min,取上清液转入另一干净的离心管中。
3.重复步骤(2)一次。
4.取步骤(3)上清液加入2.5倍体积无水乙醇,仔细混匀,-20冰箱30min以上,沉淀DNA 4℃,12000rpm离心10min。
5.弃去上层有机溶剂,加500ul75%乙醇洗涤沉淀,4℃下8000rpm离心5min,弃去上清,洗涤沉淀3次。
6.倒置或者37度培养箱烘干。
7.加50ulTE缓冲液溶解DNA,于-20℃冷藏备用。

方法二:
1. 在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液Ⅰ, 60℃水浴预热。
2. 植物5-10g, 剪碎, 在研钵中加液氮磨成粉状后立即倒入预热的离心管中, 剧烈摇动混匀, 60℃水浴保温30-60分钟(时间长,DNA产量高), 不时摇动。
3. 加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液, 颠倒混匀(需带手套, 防止损伤皮肤),室温下静置5-10分钟, 使水相和有机相分层(必要时可重新混匀)。
4. 室温下5000rpm离心5分钟。
5. 仔细移取上清液至另一50ml离心管,加入1倍体积异丙醇,混匀,室温下放置片刻即出现絮状DNA沉淀。
6. 在1.5mleppendorf中加入1ml TE。用钩状玻璃棒捞出DNA絮团,在干净吸水纸上吸干,转入含TE的离心管中,DNA很快溶解于TE。
7. 如DNA不形成絮状沉淀,则可用5000rpm离心5分钟, 再将沉淀移入TE管中。这样收集的沉淀,往往难溶解于TE,可在60℃水浴放置15分钟以上,以帮助溶解。
8. 将DNA溶液3000rpm离心5分钟,上清液倒入干净的5ml离心管。
9. 加入5μlRNaseA(10μg/μl), 37℃ 10分钟, 除去RNA(RNA对DNA的操作、分析一般无影响,可省略该步骤)。
10. 加入1/10体积的3mol/L NaAc及2×体积的冰乙醇,混匀,-20℃放置20分钟左右,DNA形成絮状沉淀。
11. 用玻棒捞出DNA沉淀,70%乙醇漂洗,再在干净吸水纸上吸干。
12. 将DNA重溶解于1ml TE, -20贮存。
13. 取2μlDNA样品在0.7% Agarose胶上电泳, 检测DNA的分子大小。同时取15μl稀释20倍, 测定OD260/OD280, 检测DNA含量及质量。

方法三:
植物DNA的SDS提取法:
试验试剂:
1、研磨缓冲液:称取59.63gNaCl,13.25g柠檬酸三钠,37.2gEDTA-Na分别溶解后合并为一,用0.2mol/L的NaOH调至pH7.0,并定容至1000ml。
2、10×SSC溶液:称取87.66gNaCl和44.12g柠檬酸三钠,分别溶解,一起定容至1000ml。
3、1×SSC溶液:用10×SSC溶液稀释10倍。
4、0.1×SSC溶液:用1×SSC溶液稀释10倍。
5、Rnase溶液:用0.14mol/LNaCl溶液配制成25mg/ml的酶液,用1mol/LHCl,pH至5.0,使用前经80℃水浴处理5min(以破坏可能存在的Dnase)。
6、氯仿-异戊醇:按24ml氯仿和1ml异戊醇混合。
7、5mol/L高氯酸钠溶液:称取NaClO4·H2O 70.23g,先加入少量蒸馏水溶解再容至100ml。
8、SDS(十二烷基硫酸钠)化学试剂的重结晶:将SDS放入无水酒精中达到饱和为止,然后在70~80℃的水浴中溶解,趁热过滤,冷却之后即将滤液放入冰箱,待结晶出现再置室温下凉干待用。
9、1mol/LHCl。
10、0.2mol/LNaOH。
11、二苯胺乙醛试剂:1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中,添加1.5ml浓硫酸,装入棕色瓶,贮存暗处,使用时加0.1ml乙醛液〔浓乙醛:H2O=1:50(V/V)〕。
12、1.0mol/L高酸溶液(HClO4)。
13、0.05mol/LNaOH。
14、DNA标准液:取标准DNA25mg溶于少量0.05mol.L-1NaOH中,再用0.05mol/LNaOH定容至25ml,后用移溶管吸取此液5ml至50ml容量瓶中,加5.0ml1mol/LHClO4,混合冷却后用0.5mol/LHClO4定容至刻度,则得100μg/ml的标准溶液。


怎样检测化妆品是否含铅汞

有三种办法可以识别化妆品是否含铅汞超标1、取出少许化妆品,涂抹在一张白纸上,或者薄塑料膜上,放在阳光下(或者自然环境),如果变黑,说明护肤品里可能含铅超标。2、将少许化妆品涂抹在白纸上,等上一会儿,等它在纸上渗透后,用硬币的立面来回的划,如果没有任何变化,就可以初步说明不含铅,如果变黑了说明含铅,颜色越深,含铅量越高。3、取一些化妆品滴在清水中,如果它沉在水底说明其中含有铅汞等重金属物质,如果浮在水面说明含动物油不益皮肤呼吸透气,能够融解在水中是最好的。扩展资料:其实美白祛斑类化妆品汞超标的问题由来已久,汞除了可以通过吸入或食入,还可通过皮肤的表皮、汗腺、皮脂腺和毛囊等皮肤附件进入体内,除了会对人体的肾脏造成伤害导致肾病综合征等外,还可对神经系统造成不同程度的伤害。因此,化妆品中的汞是必检物质,《化妆品卫生规范》中明确规定了汞在化妆品中的限量为小于1毫克/公斤。添加汞以后,可以破坏皮肤表皮层的酵素活动,使黑色素无法形成,达到快速且非常显著的美白效果,具有很大的利益诱惑。尽管职能部门曾多次进行专门整治,但是违禁添加的情况仍时有所闻,甚至有不良商家为达到他们所鼓吹的“三天美白、七天祛斑”的速效美白效果刻意违禁添加。所以,有必要提醒爱美的女孩,以后对各类速效美白产品千万要多一份警惕,对成分不明的美白产品尽量别用。如果要简单判断,可在使用美白化妆品之前取一枚银戒指或纯金饰品沾一点样品在手上划一划,如果该化妆品含有铅汞,可出现一道黑线,建议弃用。如果怀疑自己用了不合格的美白产品发生汞中毒,则应尽快到正规医院检查,作规范的驱汞治疗,以免加重病情。参考资料:人民网-美白产品汞超标后果有多严重?如何简单判断?2


最简单的方法测试化妆品是否含汞

  女人化妆是为了体现自身之美也是尊重别人的一种表现。然而很多人却不知道:化妆品给你带来美丽的同时,也会给你带来危害,因为很多化妆品都含汞超标,那么怎样检测化妆品是否含汞呢?下面我为大家介绍测试化妆品含汞的 方法 ,快来看看吧!   测试化妆品含汞的方法   1、银制品   可以取一枚银戒指沾一点化妆品,在手上一划,如含铅汞马上出现一条黑线!   2、一枚一角钱硬币、一张白纸   为了测试效果好,最好用新的;如果是已经使用过的,请将其擦拭干净,尤其是立面儿。干净的标准就是,用硬币的立面儿(将硬币立在桌面上时,与桌面接触的那个小面儿)在纸上划,不会产生黑色的划痕。   将少许化妆品涂抹在白纸上,等上一会儿,等它在纸上渗透后,用硬币的立面来回的划,如果没有任何变化,就可以初步说明不含铅汞,如果变黑了说明含铅汞,颜色越深,含铅汞量越高!   3、一杯清水   为什么用水呢?因为我们每天都用水来洗脸,水的分子和皮肤的分子接近,所以凡是能被水溶解的就能被皮肤吸收。 把你平时所用的粉底或者乳液取适量放入水中,然后观察其反应。 一般都三种情况会发生:粘在杯边,飘在水面上,沉在杯底。   粘在杯边表示化妆品含有动物油!漂在水面上表示含有矿物油!沉在杯底表示化妆品中含有重金属,铅,汞。   鉴别化妆品是否含汞的小妙招   1、使用“汞珠试剂”。   台北市推出美白化妆品“汞珠试剂”,可快速检测化妆品内是否含有汞,试剂用法非常简单,只要将试剂与化妆品搅拌,若颜色变成砖红色系,就代表含有汞。   2、看成分。   大多品牌都会在产品 说明书 中标明产品所含成分,对那些可以信赖的品牌,看其产品说明书中的成分列表是认识其安全性最简便的方法。   3、看触感、吸收速度。   越是精纯不含有害物质的产品,其触感就越细腻,肌肤吸收的速度也越快。   4、银饰品检测法。   在购买美白、去斑产品时用随身携带的银饰品蘸取少量护肤品,保持几分钟后在白纸上划几道,如果痕迹是明显的灰黑色,则表明此产品含有铅、汞,应谨慎选择。   5、PH试纸测验法。   人的肌肤呈弱酸性,在购买护肤品时先将少量产品涂在PH试纸上,几分钟后比对试纸色卡,如该产品为碱性,则不适合使用。   6、面霜产品火测法。   将少量面霜产品放在勺子里,然后加热,若烧开后面霜成牛奶状,且味道清香浓郁,则说明此产品是安全的。反之,则说明产品内矿物油超标或填充有硼化物,使用后可能对皮肤产生危害。   7、清水测验乳液法。   将少量乳液倒入水中。若乳液浮在水面上,则说明其含有油石酯。若乳液粘在杯子上,表示护肤品的主要成分是矿物质油,只要在规定范围内,对皮肤不会造成影响,但形成的保护层使皮肤层不太透气。若乳液沉入杯底,表示护肤品的主要成分是重金属,长期使用对皮肤会造成不小的伤害。若乳液与水相融,这就是安全的护肤品了。 轻摇容器,若液体变成乳白色,就说明乳液中含乳化剂,可能会破坏皮肤组织结构,导致皮肤过敏。   8、碘酒测试抗氧化。   将适量清水倒在透明玻璃器皿内,滴入碘酒,摇匀后将测试护肤品,如洗面奶、爽肤水等适量放入,充分搅拌溶液后若产品溶于水中且水恢复到透明状态,就说明该护肤品具有抗氧化作用;反之,则说明该护肤品无抗氧化功能,甚至可能加剧皮肤的氧化衰老。 测试化妆品含汞相关 文章 : 1. 如何辨别激素化妆品 2. 化妆品含汞的危害 3. 如何辨别化妆品好坏 4. 如何看化妆品成分 5. 如何辨别化妆品含激素 6. 护肤品的检测方法

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