免疫组化实验中如果二抗是山羊来源的，需要使用聚合物辅助剂，但是我不明白聚合物辅助剂的真正作用
聚合物辅助剂估计是某个厂家自己取的名字，就我的猜测，应该是一个放大系统，一个二抗（比如羊抗小鼠或者兔IgG），上面带一个长链的聚合物，聚合物上再连有很多的酶（HRP），这样就达到一个广大的效果，想对于ABC的方法，这个步骤少一步。一个二抗上配有不只一个酶，而是几个到十几个或者更多。如果直接用酶标二抗（如HRP-羊抗兔IgG），最好的结果也只是一个二抗上一个酶。
当然，就我的理解，任何事情都有好不不好的一面，象这种带聚合物的，灵敏度更高，一些微量的抗原也可以检测出来，但另一方面，可能形成假阳性。
实际使用时，你了解一下他的优劣就行了，按照试剂盒实验操作就行了，不了解的可以问一下厂家，他们应该是更清楚的。不用那一套也一样。
你可以看一看SABC试剂盒，原理有些类似，但操作时会多一步。
有谁对ELISA试剂盒了解？？
（一）ELISA测定技术的发展
然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。 一、Elisa试剂盒测定技术的发展 临床测定技术的发展主要在于方法学的发展，而方法学的发展依托于试剂生产技术不断进步更新和型标记物的应用。目前，分子生物学正在并最终肯定会让我们对整个生命科学有一个全面而彻底的认识，其对免疫测定技术发展的影响也是直接而又有效的，它使我们对以前一些难以检测的生物活性物质的测定变得轻而易举，并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。 1、基因工程试剂对免疫测定技术 发展的影响 免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应，所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料，如抗原抗体，酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原，而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体，而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各总化学合成方法制备。近年来，随着分子生物学的发展，使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂，各种新型使用的测定方法也不断出现。 HBsAg试剂特点（检测模式：临 床抗体夹心法）： 包被抗体为山羊多抗，多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性。 酶表抗体为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位。 可测得HBsAg变异样品。 提高检测的特异性（99.98%） 提高检测的灵敏度，应用Parl Ehrich 学说（PEI）HBsAg标准品，对ad标准品的灵敏度为0.05ng/ml对ay标准品灵敏度为0.025ng/ml elisa试剂盒的用途 测试剂盒检测原理 ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗体，这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与第一次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒 的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性
[编辑本段]（二） 操作步骤
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 1. 包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。 2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。 3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。 4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。 方法二 用于检测未知抗体的间接法： 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。 ↓ 加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。（同时做空白、阴性及阳性孔对照） ↓ 于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml， 37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。 ↓ 其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
[编辑本段]（三） 试剂器材
1. 试剂 （1） 包被缓冲液（PH9.60.05M碳酸盐缓冲液）: NaHCO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸馏水至1000ml （2） 洗涤缓冲液（PH7.4PBS）：0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05％ 0.5ml 加蒸馏水至1000ml （3） 稀释液： 牛血清白蛋白（BSA） 0.1克 加洗涤缓冲液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10％使用。 （4） 终止液（2M H2SO4）： 蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸（98％）21.7ml。 （5） 底物缓冲液（PH5.0磷酸枣柠檬酸）: 0.2MNa2HPO4（28.4克／L）25.7ml 0.1M柠檬酸（19.2克／L） 24.3ml 加蒸馏水50ml。 （6） TMB（四甲基联苯胺）使用液: TMB（10mg／5ml无水乙醇）0.5ml 底物缓冲液（PH5.5） 10ml 0.75％H2O2 32μl （7） ABTS使用液: ABTS 0.5mg 底物缓冲液（PH5.5） 1ml 3％H2O2 2μl （8） 抗原、抗体和酶标记抗体。 （9） 正常人血清和阳性对照血清。 2. 器材: （1） 聚苯乙烯塑料板（简称酶标板）40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。 （2） 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。 （3） 4℃冰箱，37℃孵育箱。
elisa试剂盒哪家质量好
选择elisa试剂盒的时候，需要考虑灵敏度是否高，数据是否准确，操作是否简单等方面的问题，此外，也要考虑你们实验的经费，合理选择试剂盒。在elisa试剂盒方面，武汉福来生物工程有限公司的还不错。
温育方面，武汉福来生物提醒你：
温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。
最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改变说明书操作，使用自己喜欢的温育时间和温育温度，这样造成一些不必要的麻烦。
不同试剂盒有不同的温育时间和温育温度的选择，随意更改温育时间或者温育温度将导致试验结果出现偏差。
细节决定成败
据报道，美国航天飞机“挑战者号”采用了斯沃克公司的零配件。该公司的密封图技术专家博易斯乔利多次向公司高层提醒:低温会子致橡胶密封图脆裂而引起重大事故。但是，这一意见一直没有受到重视，1986年1月27日，佛罗里达卡纳维拉尔发射场的气温降到零度以下，美国字航局再次打电话给斯沃克公司，询问其对航天飞机的发射还有没有疑虑之处，为此，斯沃克公司召开会会议，博易斯乔利坚持不能发射，但公司高层认为他所特理由还不够充分，于是同意宇航局发射，1月28日上午，航天飞机离开发射平台，仅过了73秒、热剧就发生了。
美国航天飞机由于橡胶密封图这一细节上的问题，导致了最后悲剧的发生。从这件事中，我们看到了细节是决定成败的关键。在企业管理中，许多管理者只注重最后的结果，而不在乎细节上，进而让企业受到了不少损失。
【细节的优势】
专注细节是企业的核心竞争力之一。斯沃克公司一直长期从事零配件上的研发，并且不断进取改进产品的细节上的质量，这为该公司提供了核心竞争力，最后能够成为航天飞机零配件的提供商。该企业能够在这细节做到如此的优秀，离不开好的研发流程，确保产品在研发过程中的每一个细节上的规范，因此这保证占领市场提供必要条件。因此，一个具有核心竞争力的公司背后一定有这规范的研发流程。
【细节的态度】
同时，责任心就是在细节上严格，执着。在经过多年研发中，斯沃克公司在人才储备上也成为这个企业的核心竞争力。因为优秀的技术开发人员有着强烈的责任心，为企业的技术发展提供了源源不断的内在动力。同时，优秀的技术人员会对每一个细节问题会不停的反思与总结，为产品的质量可以得到不断的改进与提升。在文中，技术人员就是本着责任心和对细节问题的反思与总结，所以不断的强调问题的严重性。
【如何做好每一个细节】
每一个细节都要反复的确认。从文中，我们可以看出航天局是如何在细节上做功夫的。首先，对于温度的变化这一细节敏锐的察觉。其次，自己的疑虑能够反复的和各个部门反复的确认。最后，得到确定的回复后才运行。通过这三点，看出宇航局对细节的认真，严谨和疑虑做出反应，这也提示我们需要对任何细节的重要性。
【细节的危害】
细节决定成败。由于斯沃克公司高层无视技术人员的忠告，没有理性的分析这一问题就匆匆下结论，最终导致了惨剧的发生。在这次的事故中，因为该公司不重视细节，进而导致该公司在市场的口碑和威望的下降，甚至能导致公司的破产，所以越是大公司越应该注重细节上的把控，不然企业就像航天飞机一样，一瞬间的决定摧毁了企业几十年的努力，这是得不偿失的。
【结论】
综上所述，细节不管是在市场的竞争中，技术的改进中等都起到了巨大的作用，只有严谨的对待每一个细节，才不至于让企业一夜之间轰然倒塌。
细节决定成败
什么是细节？就是那些看似普普通通的，却十分重要的事情。一件事情的成与败，往往一些不起眼的小事会对最后的结果产生很大的影响。细节往往决定成败，如果想要成功，那么就一定要注意细节。 为什么苹果会从树上掉下来呢？牛顿因此发现了万有引力定律。为什么水烧开了之后，水壶的盖子会跳起来呢？瓦特因此发明了蒸汽机……这一些事情在我们眼里是再也正常不过的事情了，而那些科学家却能在其中发现许多不被我们所知道的细节。那些伟大的发明与发现，那一个不是他们认真地观察生活中的细节而发现的呢？同样一件事，给不同的人看，他们会发现不同的细节。生活中的细节无处不在。一个善于发现细节的人，才能成为生活中的强者。 细小的事情往往发挥着重大的作用，一个细节，可以使你走向自己的目的地，也可以使你饱受失败的痛苦。每一件事情都是由无数个小的细节组成的，每一个都很重要。就好比是一条铁链，有无数节铁环组成，每一节都很重要，其中的哪一部分断了，整条就都没用了。 就像我平时常常不注意一些细节。比如说数学题目的过程我就常常只写其中的一部分，把另一些给漏掉。格式常常不规范。这一些细节我在写的时候并不在意他们，也没有发现他们，但是等老师改出来之后，变要后悔了。 但是想要做到重视细节并不是很简单的，需要你每时每刻都要注意着，因为细节不会摆在你的眼前，需要你去寻找并发现他们。 每一个发现细节，都会成为你将来成功的铺垫；每注意一个细节，都会使你的成功多一分希望。每当你用心地去发现他们时，你都会有惊喜的收获。
